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實驗原理： 在熒光蛋白（YFP、GFP、Luciferase等）的兩個β片層之間的環(huán)結(jié)構(gòu)上有許多特異性位點可以插入外源蛋白而不影響熒光蛋白的熒光活性.BiFC技術正是利用熒光蛋白家族的這一特性，將熒光蛋白分割成兩個不具有熒光活性的分子片段，再分別與目標蛋白融合表達。BiFC技術正是利用熒光蛋白家族的這一特性，將熒光蛋白分割成兩個不具有熒光活性的分子片段，再分別與目標蛋白融合表達。如果兩個目標蛋白因物理相互作用而靠近，就使得熒光蛋白的兩個分子片段在空間上相互靠近，重新形成有活性的熒光基團而發(fā)出熒光。 實驗目的： 在煙草植株活體細胞中檢測蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用。 交付結(jié)果： 實驗流程和共聚焦圖片等結(jié)題報告（電子版） 服務周期 30個工作日。 雙分子熒光互補(bimolecular fluorescence complementation，BiFC)分析技術，是由Hu等在2002年最先報道的一種直觀、快速地判斷目標蛋白在活細胞中的定位和相互作用的新技術·該技術巧妙地將熒光蛋白分子的兩個互補片段分別與目標蛋白融合表達，如果熒光蛋白活性恢復則表明兩目標蛋白發(fā)生了相互作用·其后發(fā)展出的多色熒光互補技術(multicolor BiFC)，不僅能同時檢測到多種蛋白質(zhì)復合體的形成，還能夠?qū)Σ煌鞍踪|(zhì)間產(chǎn)生相互作用的強弱進行比較·目前，咨詢哈爾濱雙分子熒光互補實驗,西北醫(yī)藥、保養(yǎng)，該技術已用于轉(zhuǎn)錄因子，哈爾濱雙分子熒光互補實驗,超低價醫(yī)藥、保養(yǎng)，G蛋白βγ亞基的二聚體形式，不同蛋白質(zhì)間產(chǎn)生相互作用強弱的比較以及蛋白質(zhì)泛素化等方面的研究工作上·

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將熒光蛋白在某些特定的位點切開，形成不發(fā)熒光的N和C端2個多肽，稱為N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。這2個片段在細胞內(nèi)共表達或體外混合時，不能自發(fā)地組裝成完整的熒光蛋白，哈爾濱雙分子熒光互補實驗,操作簡單醫(yī)藥、保養(yǎng)，在該熒光蛋白的激發(fā)光激發(fā)時不能產(chǎn)生熒光。但是，當這2個熒光蛋白的片段分別連接到1組有相互作用的目標蛋白上，在細胞內(nèi)共表達或體外混合這2個融合蛋白時，西安淳風生物科技有限公司,西安淳風生物科技有限公司,由于目標蛋白質(zhì)的相互作用，熒光蛋白的2個片段在空間上互相靠近互補，重新構(gòu)建成完整的具有活性的熒光蛋白分子，并在該熒光蛋白的激發(fā)光激發(fā)下，發(fā)射熒光。簡言之，如果目標蛋白質(zhì)之間有相互作用，則在激發(fā)光的激發(fā)下，產(chǎn)生該熒光蛋白的熒光。反之，若蛋白質(zhì)之間沒有相互作用，則不能被激發(fā)產(chǎn)生熒光。

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